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更新時(shí)間：2024.12.28
銀杏內(nèi)酯A/B對(duì)高膽固醇誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞膽固醇代謝的影響

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[目的]基于體外血腦屏障（BBB）環(huán)境，觀察高膽固醇環(huán)境下PC12細(xì)胞膽固醇的代謝情況及銀杏內(nèi)酯A、B對(duì)其的影響。[方法]利用Transwell裝置共培養(yǎng)星形膠質(zhì)細(xì)胞和腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞建立體外BBB，并與PCI2細(xì)胞共培養(yǎng)。在Transwell內(nèi)皮細(xì)胞側(cè)添加40μmol／L膽固醇，并分別給予30μmol／L銀杏內(nèi)酯A和25μmol／L銀杏內(nèi)酯B進(jìn)行干預(yù)。干預(yù)結(jié)束后，采用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT—PCR）技術(shù)，檢測(cè)膽固醇代謝關(guān)鍵酶低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白-1（LRP-1）、膽固醇?；D(zhuǎn)移酶（ACAT）、ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)子A1（ABCA1）及膽固醇24S-羥化酶基因（CYP46）在mRNA水平的表達(dá)。[結(jié)果]高膽固醇環(huán)境下，LRP-1表達(dá)下調(diào)（P〈0．01），ACAT及ABCA1表達(dá)上調(diào)（P〈0．05），CYP46的表達(dá)有上調(diào)趨勢(shì)；藥物干預(yù)后，除LRP-1有不同程度的升高（P〈0．05），其余各指標(biāo)均無(wú)明顯變化。[結(jié)論]GKA、B對(duì)高膽固醇環(huán)境下PCI2細(xì)胞膽固醇代謝關(guān)鍵酶LRP-1的表達(dá)有一定影響。

RP-HPLC法測(cè)定哈蟆油中膽固醇棕櫚酸酯含量

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目的運(yùn)用RP-HPLC法測(cè)定哈蟆油中膽固醇棕櫚酸酯的含量。方法使用Agilent zorbax-C18色譜柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流動(dòng)相∶甲醇-水(79∶21);柱溫:30℃;體積流速:1.5 mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng):210nm;進(jìn)樣量均為10μL。結(jié)果哈蟆油中膽固醇棕櫚酸酯進(jìn)樣量在0.188 4~0.502 4μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系,平均回收率為100.61%,RSD值為1.01%,且重復(fù)性、精密度、穩(wěn)定性均良好。結(jié)論此方法可以通過(guò)RP-HPLC法快速、穩(wěn)定、精密的測(cè)定哈蟆油中膽固醇棕櫚酸酯的含量,減少以往利用正相色譜的不便。

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