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更新時(shí)間：2024.12.28
人乳頭瘤病毒PCR產(chǎn)物酶標(biāo)-微孔板雜交分型

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目的建立聚合酶鏈反應(yīng)（ＰＣＲ）產(chǎn)物直接酶標(biāo)記微孔板反向分子雜交法用于人乳頭瘤病毒（ＨＰＶ）型別鑒定。方法利用ＨＰＶ通用引物介導(dǎo)ＰＣＲ（ＧＰＰＣＲ）擴(kuò)增靶ＤＮＡ，然后對(duì)產(chǎn)物直接標(biāo)記辣根過氧化物酶復(fù)合物（ＨＲＰＰＥＩＱＩ），與預(yù)先包被在微孔板上的ＨＰＶ寡核苷酸探針雜交后酶顯色法檢測(cè)。結(jié)果ＨＰＶ各型之間無交叉雜交；雜交靈敏度可達(dá)１３～７６個(gè)病毒ＤＮＡ拷貝，比ＰＣＲ瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)高１０倍；該法重復(fù)性好，陽性孔批內(nèi)ＣＶ為６．３４％，批間ＣＶ為１０．５３％，陰性孔批內(nèi)ＣＶ為１％，批間ＣＶ為５．７９％；而且雜交影響因素較少。結(jié)論該法特異性強(qiáng)、靈敏度高、操作簡便，無放射性和ＥＢ染料污染，雜交時(shí)間短、儀器讀取結(jié)果，便于大量常規(guī)臨床樣本定性或定量檢測(cè)。

地板樹種-多層實(shí)木地板樹種講解

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