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[目的]研究杜仲葉水提物對自由基所致的肝線粒體損傷的保護(hù)作用。[方法]采用硫代巴比妥酸比色法測定丙二醛含量、分光光度法測線粒體的腫脹度,并以還原型輔酶I-氮藍(lán)四唑-吩嗪硫酸甲酯為超氧陰離子生成系統(tǒng)測定對超氧陰離子的清除能力。小鼠背部注射D-半乳糖50d后,利用試劑盒測定杜仲葉水提物對小鼠肝臟超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶和抗羥自由基活性的影響。[結(jié)果]杜仲葉水提物可減輕肝臟的損傷,抑制線粒體腫脹,具有清除超氧陰離子,增強(qiáng)抗氧化酶的活性。[結(jié)論]該研究為杜仲葉資源的開發(fā)與應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)。
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目的:探討葛根素對MPP+誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞損傷的保護(hù)機(jī)制。方法:臺盼藍(lán)染色檢測細(xì)胞存活率;PI單染流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞周期分布;ELISA和Western blotting法檢測胞漿Cyt C的變化;ELISA方法檢測Caspase-3,Caspase-8和Caspase-9酶活性;DNA ladder分析藥物對細(xì)胞凋亡的干預(yù)作用。結(jié)果:在12.550μmol.L-1,葛根素對MPP+誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞損傷具有一定的保護(hù)作用,并呈一定的量效關(guān)系;PI單染流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示MPP+誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞發(fā)生凋亡,并阻滯細(xì)胞于G2/M期,預(yù)先加入不同劑量的葛根素可以逆轉(zhuǎn)MPP+對SH-SY5Y細(xì)胞損傷作用。West-ern blotting和ELISA分析結(jié)果均顯示葛根素能夠抑制MPP+誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞的Cyt C的釋放。不同劑量的葛根素也能夠抑制MPP+誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞的Caspase-3和Caspase-9的活性,但對Caspase-8的活性影響不明顯;DNAladder分析也顯示葛根素可以抑制MPP+誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞凋亡。結(jié)論:葛根素可以提高M(jìn)PP+誘導(dǎo)的SH-SY5Y損傷的細(xì)胞存活率,抑制細(xì)胞凋亡的發(fā)生,其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)線粒體Caspase通路和干預(yù)細(xì)胞周期有關(guān)。
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