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運用單因素試驗法對影響也門鐵ISSR-PCR擴(kuò)增的各個因素進(jìn)行了優(yōu)化,優(yōu)化體系為:25μL反應(yīng)體系中,Taq酶濃度0.04 U.μL-1、dNTPs濃度0.18 mmol.L-1、引物濃度0.4μmol.L-1、Mg2+濃度2.0mmol.L-1、模板濃度0.8 ng.μL-1、甲酰胺濃度1.6%、1×buffer,最后用dd H2O補(bǔ)足到25μL。利用優(yōu)化體系和篩選的引物對也門鐵及其嵌合體品種進(jìn)行了ISSR擴(kuò)增分析。
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19世紀(jì)50年代初至一戰(zhàn)前,是巴西鐵路建設(shè)從萌芽到擴(kuò)建高潮的歷史階段。以英國為首的資本主義國家伴隨著商品輸出,將大量剩余資本也滲入巴西,促進(jìn)了巴西鐵路的興建,從而推動巴西現(xiàn)代交通運輸業(yè)的發(fā)展。巴西近代鐵路得以蓬勃發(fā)展,離不開國內(nèi)外鐵路資本的大融合,鐵路融資對巴西近代鐵路網(wǎng)乃至巴西經(jīng)濟(jì)的發(fā)展至關(guān)重要。巴西鐵路融資是鐵路建設(shè)的經(jīng)濟(jì)基礎(chǔ),其融資緣由值得探討。
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