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目的以擬多形假絲酵母菌(ATCC26012)為材料,構(gòu)建遺傳穩(wěn)定性良好的尿嘧啶和亮氨酸雙營(yíng)養(yǎng)缺陷型工程化菌株。方法利用物化及基因工程等方法對(duì)擬多形假絲酵母菌株的染色體進(jìn)行改造,將ura3基因和leu2基因進(jìn)行定向誘變,以獲得尿嘧啶和亮氨酸雙營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變菌株,并對(duì)其進(jìn)行生物學(xué)鑒定,包括菌株的遺傳穩(wěn)定性、基因序列及生理生化特征分析等。結(jié)果篩選得到尿嘧啶和亮氨酸雙營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變菌株,鑒定結(jié)果顯示該菌株遺傳穩(wěn)定性良好,標(biāo)志基因均發(fā)生定向改變,生理生化結(jié)果顯示該菌株能利用多種碳源和氮源,且生長(zhǎng)狀況良好。結(jié)論擬多形假絲酵母的雙營(yíng)養(yǎng)缺陷型工程化改造為進(jìn)一步研究該菌株的遺傳學(xué)奠定了基礎(chǔ),為多價(jià)蛋白組成類病毒顆粒的外源表達(dá)提供了工程化宿主。進(jìn)而,為復(fù)雜疫苗抗原的重組表達(dá)和功能研究提供了技術(shù)手段。
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