冷凍保護劑

滲透性冷凍保護劑多是一些小分子物質(zhì)，可以透過細胞膜滲透到細胞內(nèi)。

滲透性冷凍保護劑主要包括二甲基亞砜、甘油、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等。其保護機制是在細胞冷凍懸液完全凝固之前，滲透到細胞內(nèi)，在細胞內(nèi)外產(chǎn)生一定的摩爾濃度，降低細胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度，從而保護細胞免受高濃度電解質(zhì)的損傷同時。細胞內(nèi)水分也不會過分外滲，避免了細胞過分脫水皺縮。

在使用滲透性冷凍保護劑時，需要一定時間進行預(yù)冷，在細胞內(nèi)外達到平衡以起到充分的保護作用。

目前使用較多的是二甲基亞砜、甘油、乙二醇和丙二醇等。

非滲透性冷凍保護劑一般是些大分子物質(zhì)，不能滲透到細胞內(nèi)。

非滲透性冷保護劑主要包括聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖、白蛋白及羥乙基淀粉等。

保護機制的假設(shè)很多，其中一種可能是聚乙烯吡咯烷酮等大分子物質(zhì)可以優(yōu)先同溶液中的水分子相結(jié)合，降低溶液中自由水的含量，使冰點降低，減少冰晶的形成;同時，由于其分子量大，使溶液中電解質(zhì)濃度降低，從而減輕溶質(zhì)損傷。

?凍存保護劑是指可以保護細胞免受冷凍損傷的物質(zhì)(常為溶液)。

細胞懸液中加入冷凍保護劑可保護細胞免受溶液損傷和冰晶損傷。冷凍保護劑同溶液中的水分子結(jié)合，發(fā)生水合作用，弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而減少冰晶的形成，同時冷凍保護劑可以通過在細胞內(nèi)外維持一定的摩爾濃度，降低細胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度，使細胞免受溶質(zhì)的損傷。

冷凍保護劑根據(jù)其是否穿透細胞膜可分為滲透性和非滲透性兩類。

冰晶損傷:因細胞內(nèi)部結(jié)冰而導(dǎo)致的細胞損傷;

溶液損傷:因保存溶液中溶質(zhì)濃度升高而導(dǎo)致的細胞損傷;

滲透性冷凍保護劑:可以滲透到細胞內(nèi)，一般是一些小分子物質(zhì)，主要包括甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等;

非滲透性冷凍保護劑:不能滲透到細胞內(nèi)，一般是寫大分子物質(zhì)，主要包括聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖、白蛋白以及羥乙基淀粉等。