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以提高3-羥基丙酸的產(chǎn)量為目標(biāo),對(duì)實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的基因工程大腸桿菌進(jìn)行改造,敲除形成副產(chǎn)物1,3-丙二醇的主要酶基因——乙醛脫氫酶基因yqh D,得到E.coli W3110Δyqh D(p CDFDuet-tac-gpd1-TUkgsadh/p ACYCDuet-tac-dha B1-4),該工程菌搖瓶發(fā)酵產(chǎn)量達(dá)到2.53 g/L,相比未敲除yqh D基因的菌株,產(chǎn)量提高了5.8倍。另外,敲除了甘油代謝途徑中的抑制因子glpR基因,得到E.coli W3110ΔglpR(p CDFDuet-tac-gpd1-TUkgsadh/p ACYCDuet-tac-dha B1-4),該工程菌搖瓶發(fā)酵產(chǎn)量達(dá)到2.86 g/L,相比未敲除glpR基因的菌株,產(chǎn)量提高了6.7倍。后經(jīng)5 L罐發(fā)酵培養(yǎng)后,3-羥基丙酸的產(chǎn)量提升到15.4 g/L。該實(shí)驗(yàn)為進(jìn)一步利用大腸桿菌工程菌發(fā)酵生產(chǎn)3-羥基丙酸提供了研究基礎(chǔ)。
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以提高3-羥基丙酸的產(chǎn)量為目標(biāo),對(duì)實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建的基因工程大腸桿菌進(jìn)行改造,敲除形成副產(chǎn)物1,3-丙二醇的主要酶基因——乙醛脫氫酶基因yqh D,得到E.coli W3110Δyqh D(p CDFDuet-tac-gpd1-TUkgsadh/p ACYCDuet-tac-dha B1-4),該工程菌搖瓶發(fā)酵產(chǎn)量達(dá)到2.53 g/L,相比未敲除yqh D基因的菌株,產(chǎn)量提高了5.8倍。另外,敲除了甘油代謝途徑中的抑制因子glpR基因,得到E.coli W3110ΔglpR(p CDFDuet-tac-gpd1-TUkgsadh/p ACYCDuet-tac-dha B1-4),該工程菌搖瓶發(fā)酵產(chǎn)量達(dá)到2.86 g/L,相比未敲除glpR基因的菌株,產(chǎn)量提高了6.7倍。后經(jīng)5 L罐發(fā)酵培養(yǎng)后,3-羥基丙酸的產(chǎn)量提升到15.4 g/L。該實(shí)驗(yàn)為進(jìn)一步利用大腸桿菌工程菌發(fā)酵生產(chǎn)3-羥基丙酸提供了研究基礎(chǔ)。
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