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采用70%的甲醇溶液為提取劑,索氏提取法對白三葉草中綠原酸進(jìn)行提取,HPLC法對其中綠原酸進(jìn)行檢測。Luna C18柱(4.6mm×150mm,5μm),流動相為乙腈-0.4%磷酸溶液(體積比1:9),波長327nm,流速1.0mL/min。綠原酸在0.240~3.600μg呈良好線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)r為0.999 6。結(jié)果表明白三葉草中含有綠原酸且含量較高。
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斑潛蠅隸屬雙翅目(Diptera)潛蠅科(Agromyzidae)斑潛蠅屬(Liriomyza),是一類重要的農(nóng)業(yè)害蟲。近年來,隨著海峽兩岸果蔬貿(mào)易的快速發(fā)展,斑潛蠅類害蟲傳入大陸地區(qū)的風(fēng)險明顯增加,植物檢疫部門急需該類害蟲的快速鑒定技術(shù)和方法。本研究針對我國進(jìn)境檢疫性害蟲三葉草斑潛蠅(L.trifolii),在檢測和檢索其線粒體DNA細(xì)胞色素氧化酶I(mtDNA COI)基因序列并與其近緣種美洲斑潛蠅(L.sati-vae)和南美斑潛蠅(L.huidobrensis)相同基因序列比對的基礎(chǔ)上,設(shè)計并篩選了其種類識別特異引物,初步實現(xiàn)了三葉草斑潛蠅的快速鑒定。