染料木族分布

目的:研究滿天星活性成分染料木黃酮對脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)或D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-Gal N)誘導引起的小鼠急性肝損傷的保護作用及其機制。方法:雄性小鼠隨機分為正常組、模型組、染料木黃酮低、中、高劑量組。正常組和模型組ip等容量生理鹽水,染料木黃酮低、中、高劑量組分別腹腔注射0.5,1,2 mg·kg-1的染料木黃酮,每日1次。連續(xù)給藥3 d后,除正常組外,其余各組小鼠ip LPS(50μg·kg-1)和D-Gal N(800 mg·kg-1),1.5 h后,眼眶血管叢取血,6 h后處死。采集肝臟組織,檢測小鼠血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT),天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST),膽紅素的水平;并檢測各組小鼠肝組織中丙二醛(MDA),腫瘤壞死因子-α(TNF-α),一氧化氮(NO)含量及TNF-α,誘導型一氧化氮合酶(i NOS)mRNA,核因子(NF)-κB p65,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和B細胞淋巴瘤/白血病2(Bcl-2)表達情況;同時做組織學檢查,觀察肝組織的病理變化。結(jié)果:與模型組比較,染料木黃酮顯著降低小鼠血清中AST,ALT活性,明顯減輕組織病理損傷;可抑制NF-κB的激活,繼而減少炎癥因子TNF-α,NO和i NOS的水平。此外,染料木黃酮明顯抑制Caspase-3的表達,提高Bcl-2的水平,提升膽紅素的含量。結(jié)論:滿天星染料木黃酮對小鼠急性肝損傷具有明顯的保護作用,其機制與抑制NF-κB信號通路、減輕炎癥反應(yīng)有關(guān)。

為了建立葛花中大豆苷、鳶尾苷和染料木素3種異黃酮成分的HPLC測定方法,試驗采用色譜柱為Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm),流動相為乙腈-1‰磷酸水溶液,梯度洗脫(0~20 min,13%乙腈;20~30 min,27%乙腈;30~40 min,32%乙腈;40~50 min,36%乙腈;50~60 min,43%乙腈),流速為0.8 m L/min,檢測波長為264 nm,柱溫為30℃的HPLC方法進行檢測。結(jié)果表明:大豆苷、鳶尾苷和染料木素的線性范圍分別為0.126~5.040 mg/m L(R2=0.999 7),0.096~3.840 mg/m L(R2=0.999 6)和0.034~1.360 mg/m L(R2=0.999 9);平均回收率分別為99.22%(RSD=1.11%)、103.89%(RSD=1.89%)和99.93%(RSD=1.53%)。說明該方法能夠?qū)⒏鸹ㄖ卸喾N異黃酮類成分分離,準確可靠,專屬性強,結(jié)果穩(wěn)定,可用于葛花藥材的質(zhì)量控制。