三維熒光光譜特點(diǎn)

1)用三維投影方式表示的熒光光譜圖，比較直觀，較容易從圖上觀察到熒光峰的位置和高度以及光譜的某些特性，但不易直接提供激發(fā)一發(fā)射波長對(duì)所相應(yīng)的熒光發(fā)射強(qiáng)度的信息。

2)在固定激發(fā)波長和發(fā)射波長差的同步掃描中每一化合物都有一單一的熒光譜峰，而每一化合物的等高線圖則被局限于一個(gè)長方形的方框之內(nèi)，如果樣品中含有四種熒光化合物則將有四個(gè)長方形框，但只能在不重疊的位置才可以對(duì)組份進(jìn)檢測。等高線熒光光譜圖比較容易進(jìn)行圖形比較。

3)三維熒光光譜圖，由于比二維的平面圖多了一個(gè)坐標(biāo)，所得的總熒光數(shù)據(jù)又比普通熒光譜多得多，故其具有高選擇性，可用于多組份混合物的分析。

獲取三維熒光光譜，最簡單的辦法是用一般的熒光分光光度計(jì)，分別測定各個(gè)不同激發(fā)波長下熒光發(fā)射光譜。例如，激發(fā)波長每增加或減少10nm即測繪一次發(fā)射光譜。然后利用所獲得的一系列光譜數(shù)據(jù)，繪制三維投影圖或等高線光譜圖。這樣的方法較麻煩，在缺少先進(jìn)設(shè)備的情況下可采用。較一般的辦法是應(yīng)用微機(jī)控制的自動(dòng)掃描記錄熒光分光光度計(jì)，每次在保持一定的激發(fā)波長增量條件下，重復(fù)進(jìn)行發(fā)射光譜掃描，并將所測取的熒光強(qiáng)度信號(hào)輸入計(jì)算機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和作圖。更為先進(jìn)的測取三維熒光光譜的方法是利用電視熒光計(jì)。它是由正交多色器、電視檢測器和電子計(jì)算機(jī)接口等部件所組成，能自動(dòng)獲得三維熒光光譜圖。

三維熒光光譜圖的表示方式有兩種，即三維投影圖和等高線熒光光譜圖。

三維熒光光譜收集了試樣的總熒光數(shù)據(jù)，它是一系列的熒光激發(fā)光譜和發(fā)射光譜的匯集。由計(jì)算機(jī)收集掃描數(shù)據(jù)，通常以發(fā)射波長作為x軸，激發(fā)波長作為y軸，熒光強(qiáng)度作為z軸而構(gòu)成三維投影圖.作圖時(shí)y軸的激發(fā)波長可以由小到大，所得的為正面圖，也可以由大到小，所得的為背面圖。

人血漿在pH為7.40(磷酸鹽緩沖溶液)水溶液中，于23℃溫度下記錄的總熒光三維投影正面圖。此體系的最強(qiáng)熒光峰在紫外光區(qū)，而在可見光域的熒光強(qiáng)度則低的很多。

在計(jì)算機(jī)收集總熒光掃描數(shù)據(jù)之后，用計(jì)算機(jī)的某種程序或用三維自動(dòng)繪圖儀，以發(fā)射波長為x軸，激發(fā)波長為夕軸，把熒光強(qiáng)度相等的點(diǎn)用線連接來起，則在平面上形成等高線圖，稱為等高線熒光光譜圖。

物質(zhì)的熒光強(qiáng)度F與激發(fā)光的波長和所測量發(fā)射光的波長有關(guān)，將F的數(shù)據(jù)用矩陣形式表示，行和列對(duì)應(yīng)不同的激發(fā)光波長和發(fā)射光波長，每個(gè)矩陣元分別為該激發(fā)光、發(fā)射光波長的熒光強(qiáng)度F，稱之為激發(fā)-發(fā)射矩陣，簡稱EEM。描述熒光強(qiáng)度及同時(shí)隨激發(fā)波長和發(fā)射波長變化的關(guān)系圖譜即為三維熒光光譜。三維熒光光譜有兩種表示形式。

1)用血液的等高線熒光光譜檢查人體的健康情況。人類的血液由多種成份組成，但只有幾種成份對(duì)總熒光有影響。當(dāng)人體的情況出現(xiàn)問題時(shí)，總熒光的可見光譜部分就有相當(dāng)顯著的變化。在積累大量主要成份的熒光光譜數(shù)據(jù)的情況下，從血液的等高線熒光光譜圖就可以對(duì)病情進(jìn)行了解和診斷。

2)三維熒光光譜幫助解決刑事案件。三維熒光光譜對(duì)于兩種汽油樣品是否相同，較之氣相一液相色譜具有更強(qiáng)的辨別能力，尤其是采用光譜相減法對(duì)刑事案件的確證確實(shí)大有幫助。例如，在一縱火案的現(xiàn)場獲得了一些未盡燃燒的少量汽油樣品，而從嫌疑犯處亦獲得汽油樣品。為確證案犯，可進(jìn)行三維熒光光譜相減法加以分析判斷。測定時(shí)，將兩個(gè)樣品分別溶于光譜純的己烷中配成25ppm的分析試液，進(jìn)行三維熒光光譜的測量，獲得總熒光的數(shù)據(jù)。然后由計(jì)算機(jī)對(duì)這兩個(gè)樣品的三維熒光光譜進(jìn)行相減，得出減余光譜。如果這兩種樣品是同一來源，則所得的減余光譜將是平坦的，任何一點(diǎn)的熒光強(qiáng)度都基本上等于零.如果這兩種樣品并非來自同一來源，則所得的減余光譜將不是平坦的，而有不少小"山包"。

由光源、激發(fā)光源、發(fā)射光源、試樣池、檢測器、顯示裝置等組成。

熒光光譜儀可分為X射線熒光光譜儀和分子熒光光譜儀。

1.熒光激發(fā)光譜和熒光發(fā)射光譜

2.同步熒光(波長和能量)掃描光譜

3.3D(Ex Em Intensity)

4.Time Base和CWA(固定波長單點(diǎn)測量)

5.熒光壽命測量，包括壽命分辨及時(shí)間分辨

6.計(jì)算機(jī)采集光譜數(shù)據(jù)和處理數(shù)據(jù)(Datamax和Gram32)

儀器類別: 03030429 /儀器儀表 /成份分析儀器 /X熒光譜儀

指標(biāo)信息:

激發(fā)光源 Xe 450W

激發(fā)單色儀:4nm/mm,200nm~700nm

發(fā)射單色儀:雙色單儀，2nm/mm,300~1000nm

光譜測量范圍:240nm~850nm

靈敏度:水喇曼信噪比4000:1(397nm/5nm bandpass)

壽命響應(yīng)范圍:10ps~10μs

新型型號(hào)

能量色散X射線熒光光譜采用脈沖高度分析器將不同能量的脈沖分開并測量。能量色散X射線熒光光譜儀可分為具有高分辨率的光譜儀，分辨率較低的便攜式光譜儀，和介于兩者之間的臺(tái)式光譜儀。高分辨率光譜儀通常采用液氮冷卻的半導(dǎo)體探測器，如Si(Li)和高純鍺探測器等。低分辨便攜式光譜儀常常采用正比計(jì)數(shù)器或閃爍計(jì)數(shù)器為探測器，它們不需要液氮冷卻。采用電致冷的半導(dǎo)體探測器，高分辨率譜儀已不用液氮冷卻。同步輻射光激發(fā)X射線熒光光譜、質(zhì)子激發(fā)X射線熒光光譜、放射性同位素激發(fā)X射線熒光光譜、全反射X射線熒光光譜、微區(qū)X射線熒光光譜等較多采用的是能量色散方式。

熒光光譜儀被廣泛應(yīng)用于化學(xué)、環(huán)境和生物化學(xué)領(lǐng)域。

是研究小分子與核酸相互作用的主要手段。通過藥物與核酸相互作用，使DNA與探針鍵合的程度減小，反映在探針熒光光譜的改變，從而可以了解藥物和核酸的作用機(jī)理。

熒光光譜儀是研究藥物與蛋白質(zhì)相互作用的常用儀器。藥物與蛋白質(zhì)相互作用后可能引起藥物自身熒光光譜和蛋白質(zhì)自身熒光(內(nèi)源熒光)光譜以及同步熒光光譜的變化，如熒光強(qiáng)度和偏振度的改變、新熒光峰的出現(xiàn)等，這些均可以提供藥物與蛋白質(zhì)結(jié)合的信息。