園藝植物生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)（第二版）

第二版前言

第一版前言

第一部分 細(xì)胞工程

實(shí)驗(yàn)1-1 培養(yǎng)基母液的配制

實(shí)驗(yàn)1-2 培養(yǎng)基配制與滅菌

實(shí)驗(yàn)1-3 植物材料的消毒與接種

實(shí)驗(yàn)1-4 愈傷組織誘導(dǎo)及懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

實(shí)驗(yàn)1-5 植物莖尖脫毒與病毒檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)1-6 胚狀體誘導(dǎo)技術(shù)

實(shí)驗(yàn)1-7 花藥培養(yǎng)及花粉發(fā)育時(shí)期的鑒定

實(shí)驗(yàn)1-8 胚挽救技術(shù)

實(shí)驗(yàn)1-9 原生質(zhì)體分離與純化

實(shí)驗(yàn)1-10 原生質(zhì)體培養(yǎng)

實(shí)驗(yàn)1-11 原生質(zhì)體融合

實(shí)驗(yàn)1-12 植物離體培養(yǎng)誘導(dǎo)開(kāi)花

實(shí)驗(yàn)1-13 蘭花原球莖快繁

實(shí)驗(yàn)1-14 香蕉快繁技術(shù)

實(shí)驗(yàn)1-15 離體種質(zhì)保存

第二部分 基因工程

實(shí)驗(yàn)2-1 基因組DNA提取

實(shí)驗(yàn)2-2 RNA提取與逆轉(zhuǎn)錄

實(shí)驗(yàn)2-3 核酸瓊脂糖凝膠電泳

實(shí)驗(yàn)2-4 核酸定量

實(shí)驗(yàn)2-5 PCR基本技術(shù)

實(shí)驗(yàn)2-6 DNA連接、感受態(tài)細(xì)胞制備與轉(zhuǎn)化

實(shí)驗(yàn)2-7 質(zhì)粒提取與重組質(zhì)粒的酶切鑒定

實(shí)驗(yàn)2-8 重組質(zhì)粒的PCR鑒定

實(shí)驗(yàn)2-9 RACE克隆全長(zhǎng)基因

實(shí)驗(yàn)2-10 愈傷組織或懸浮細(xì)胞與根癌農(nóng)桿菌共培養(yǎng)轉(zhuǎn)化

實(shí)驗(yàn)2-11 上胚軸與根癌農(nóng)桿菌共培養(yǎng)轉(zhuǎn)化

實(shí)驗(yàn)2-12 葉盤與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)轉(zhuǎn)化

實(shí)驗(yàn)2-13 子葉與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)轉(zhuǎn)化

實(shí)驗(yàn)2-14 生殖器官與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)轉(zhuǎn)化

實(shí)驗(yàn)2-15 原生質(zhì)體PEG介導(dǎo)轉(zhuǎn)化

實(shí)驗(yàn)2-16 發(fā)根農(nóng)桿菌介導(dǎo)的目的基因轉(zhuǎn)化

實(shí)驗(yàn)2-17 基因槍轉(zhuǎn)化外源基因

實(shí)驗(yàn)2-18 GUS或GFP檢測(cè)

實(shí)驗(yàn)2-19 Southem雜交

實(shí)驗(yàn)2-20 RT-PCR技術(shù)

實(shí)驗(yàn)2-21 Rea1-timePCR技術(shù)

實(shí)驗(yàn)2-22 Northern雜交

實(shí)驗(yàn)2-23 蛋白質(zhì)的定量

實(shí)驗(yàn)2-24 Western雜交

實(shí)驗(yàn)2-25 基因的亞細(xì)胞定位技術(shù)

實(shí)驗(yàn)2-26 目的基因在大腸桿菌中的誘導(dǎo)和表達(dá)

實(shí)驗(yàn)2-27 目的基因在酵母中的誘導(dǎo)和表達(dá)

實(shí)驗(yàn)2-28 酵母單雜交技術(shù)

實(shí)驗(yàn)2-29 酵母雙雜交技術(shù)

實(shí)驗(yàn)2-30 雙分子熒光互補(bǔ)分析

實(shí)驗(yàn)2-31 植物啟動(dòng)子的功能分析

實(shí)驗(yàn)2-32 凝膠遷移實(shí)驗(yàn)

第三部分 DNA分子標(biāo)記

實(shí)驗(yàn)3-1 RAPD分子標(biāo)記

實(shí)驗(yàn)3-2 AF1P分子標(biāo)記

實(shí)驗(yàn)3-3 SSR分子標(biāo)記

實(shí)驗(yàn)3-4 ISSR分子標(biāo)記

實(shí)驗(yàn)3-5 SRAP分子標(biāo)記

實(shí)驗(yàn)3-6 SCoT分子標(biāo)記

……

附錄

主要參考文獻(xiàn)

園藝植物生物技術(shù)的發(fā)展日新月異，為反映該領(lǐng)域的新技術(shù)，適應(yīng)培養(yǎng)園藝植物生物技術(shù)創(chuàng)新人才培養(yǎng)的要求，培養(yǎng)學(xué)生們的動(dòng)手能力，作為《園藝植物生物技術(shù)》的配套教材，特編輯《園藝植物生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》教材。全書分三個(gè)部分，即細(xì)胞工程、基因工程和DNA分子標(biāo)記。細(xì)胞工程部分選編了15個(gè)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，包括培養(yǎng)基母液的配制、培養(yǎng)基配制與滅菌、植物材料的消毒與接種、愈傷組織誘導(dǎo)及懸浮細(xì)胞培養(yǎng)、植物莖尖脫毒與病毒檢測(cè)、胚狀體誘導(dǎo)技術(shù)、花藥培養(yǎng)及花粉發(fā)育時(shí)期的鑒定、胚挽救技術(shù)、原生質(zhì)體分離與純化、原生質(zhì)體培養(yǎng)、原生質(zhì)體融合、植物離體培養(yǎng)誘導(dǎo)開(kāi)花、蘭花原球莖快繁、香蕉快繁技術(shù)、離體種質(zhì)保存；基因工程部分選編了32個(gè)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，包括基因組DNA提取、RNA提取與逆轉(zhuǎn)錄、核酸瓊脂糖凝膠電泳、核酸定量、PCR基本技術(shù)、DNA連接和感受態(tài)細(xì)胞制備與轉(zhuǎn)化、質(zhì)粒提取與重組質(zhì)粒的酶切鑒定、重組質(zhì)粒的PCR鑒定、RACE克隆全長(zhǎng)基因、愈傷組織或懸浮細(xì)胞與根癌農(nóng)桿菌共培養(yǎng)轉(zhuǎn)化、上胚軸與根癌農(nóng)桿菌共培養(yǎng)轉(zhuǎn)化、葉盤與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)轉(zhuǎn)化、子葉與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)轉(zhuǎn)化、生殖器官與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)轉(zhuǎn)化、原生質(zhì)體PEG介導(dǎo)轉(zhuǎn)化、發(fā)根農(nóng)桿菌介導(dǎo)的目的基因轉(zhuǎn)化、基因槍轉(zhuǎn)化外源基因、GUS或GFP檢測(cè)、Southern雜交、RT-PCR技術(shù)、Real-timePCR技術(shù)、Northern雜交、蛋白質(zhì)的定量、Western雜交、基因的亞細(xì)胞定位技術(shù)、目的基因在大腸桿菌中的誘導(dǎo)和表達(dá)、目的基因在酵母中的誘導(dǎo)和表達(dá)、酵母單雜交技術(shù)、酵母雙雜交技術(shù)、雙分子熒光互補(bǔ)分析、植物啟動(dòng)子的功能分析、凝膠遷移實(shí)驗(yàn)；DNA分子標(biāo)記部分選編了6個(gè)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，包括RAPD、AFLP、SSR、ISSR、SRAP和SCoT分子標(biāo)記。所有實(shí)驗(yàn)均包含實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮驮怼⒃嚥募捌骶?、?shí)驗(yàn)步驟、思考題與作業(yè)，除此之外，作者還結(jié)合自己的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，增加了操作提示的內(nèi)容，目的是使初學(xué)者盡快掌握?qǐng)@藝植物生物技術(shù)的實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)。書后有附錄，內(nèi)容包括常用培養(yǎng)基和《園藝植物生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)（第二版）》所用培養(yǎng)基配方、常用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的配制、常用抗生素的配制與使用、常用試劑及緩沖液的配制、凝膠電泳中DNA和蛋白質(zhì)的有效分離范圍和同位素（a-32P）操作注意事項(xiàng)。

《園藝植物生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)（第二版）》適用于園藝專業(yè)生物技術(shù)方向本科生和研究生實(shí)驗(yàn)教學(xué)，也可供相關(guān)科研人員參考。

（注：課程大綱排版從左到右列 ）

園藝植物生物技術(shù)課題背景

園藝既是一門科學(xué)，又是一門藝術(shù)，園藝是社會(huì)進(jìn)步與文明程度的標(biāo)志。園藝植物生物技術(shù)是園藝學(xué)和生物技術(shù)的交叉技術(shù)學(xué)科。

園藝植物生物技術(shù)課程定位

園藝植物生物技術(shù)是一門介紹與園藝植物相關(guān)生物技術(shù)的在線開(kāi)放課程。

2018年，園藝植物生物技術(shù)被中華人民共和國(guó)教育部認(rèn)定為“國(guó)家精品在線開(kāi)放課程”。